Service - Analysis

Introduction

The major activity of this core is to provide multi-plex assay to measure mediator levels in patients’ sera.

Multiplex assay is a technology that allows for the simultaneous quantification of analytes in serum/plasma and culture supernatants, making them a useful tool in both disease mechanistic studies and in biomarker discovery. Available analytes include cytokines, chemokines and growth factors. We currently offer both fully validated cytokine/chemokine panels and subpanels and other panels pertaining to immunology, metabolism, toxicity, etc. Multiplex assay panels are customizable to the investigators’ needs. For projects, prior consultation with the laboratory is recommended to ensure optimal sample processing.

The multiplex is capable of measuring up to 100 analytes. Multiplex assay can be used for the detection of multiple cytokines in serum, plasma or supernatants. It‘s consist of beads dyed with differing concentrations of two fluorophores to generate distinct bead sets. Each bead set is coated with a capture antibody specific for a specific cytokine. A second biotinylated antibody and streptavidin-phycoerythrin (S-PE) is used to detect the captured cytokine. The Bio-plex 200 analyzer is a dual laser, flow-based, sorting and detection platform. One laser detects the beads and determines which cytokine is being detected. The second laser determines the magnitude of PE-derived signal, which is proportional to the amount of cytokine bound.


Process

process

Sample Preparation

Serum prep

  • Allow blood to clot at room temperature for 30-45 min before proceeding to centrifugation steps.
  • Centrifuge at 1,000 x g for 15 min at 4C and transfer into a clean tube.
  • Repeat centrifuge at 1,000 x g for 10 min at 4C to completely remove platelets and precipitates.
  • Aliquot and store undiluted sample at -80 ℃ if not using immediately.

Plasma prep

  • Use collection tubes coated with anticoagulant (EDTA is the recommended anticoagulant for preparing plasma samples)
  • Centrifuge at 1,000 x g for 15 min at 4C and transfer into a clean tube.
  • Repeat centrifuge at 1,000 x g for 10 min at 4C to completely remove platelets and precipitates.
  • Aliquot and store undiluted sample at -80℃ if not using immediately.

Note

  • Use protease inhibitor when profiling for diabetes/metabolic markers.
  • Extremely lipemic samples may be filtered with a 0.22 µm filter to prevent clogging.
  • Hemolyzed samples are not suitable for Bio-Plex Pro™ diabetes assays.
  • Serum is qualitatively different from plasma because of how the removal of fibrinogen and other proteins that form fibrin clots affects coagulation.
  • Protein concentration of serum is 3~4% less than that of plasma.
  • Extremely lipemic samples may be filtered with a 0.22 µm filter to prevent clogging.

Assay Range

MPI assay range for human mediators

MPI assay range for human mediators

MPI assay range for mouse mediators

MPI assay range for mouse mediators

Price

For detecting 6 mediators in one 96 well plate

Research institute inside Academia Sinica (NTD/plate) Research institute outside Academia Sinica (NTD/plate) Company (NTD/plate)
25,000 28,000 50,000

For detecting more mediators (N≧6) in one 96 well plate

Research institute inside Academia Sinica (NTD/plate) Research institute outside Academia Sinica (NTD/plate) Company (NTD/plate)
25,000 x N/6 28,000 x N/6 50,000 x N/6

Note: Technically, 80 unknowns can be assayed in one plate. We recommend users apply duplicated assay (40 unknowns/ plate).


Billing Procedures

billing procedures pic

繳費流程

  1. 使用者填單申請
  2. 核心實驗室根據切片數量與項目計算價格。審核無誤後,再由核心E-mail通知使 用者進行繳款。
  3. 使用者繳款(如有中研院院內經費,建議先行使用院內繳費方式)。
  4. 確認收到款項後,將提供收據與使用紀錄予申請者以利存檔備份。
  5. 送件通知會連同收據一同寄出,即可寄送樣本並進行服務。

※若超過額度,可先繳交部分之費用,即可進行服務(例如:若訂單總價超過30萬可先預繳50%之費用並進行服務,並於一個月內繳清尾款)。

[繳費注意事項]
  1. 核心設施服務項目皆為付款後再開始操作,PI簽名確認並繳費後,款項不予退費。
  2. 若有特殊情形無法先繳費,請填妥 [核心訂單確認暨延遲付款切結書] ( 按此下載切結書 ),並通知核心。核心接到信件後,將函覆計畫主持人確認已收到此切結書,並提前開始執行該訂單。每個申請案僅能申請一次。
  3. 因各單位請購程序不同,使用者自提出請購到行政單位實際將經費撥款至中央研究院帳戶所需時間可能長達3-4週,請務必考量貴單位行政程序所需之時間。
[送件注意事項]
  1. 核心確認收到款項後會寄送送件通知。通知送件後若一個月內未送件,核心會再寄送一次送件通知。若超過三個月未送件視同棄單,不予退費。
  2. 若有特殊情況需延長送件時間,請來信告知核心,並告知欲送件時間。若未明確告知欲送件時間,將自動延長送件時效一個月。每個申請案僅能申請一次。

院內繳費方式

  • 請申請者回覆信件同意扣款。
  • 核心將經由院內PI轉帳系統執行轉帳。
  • 即日起,中研院同仁若使用國科會經費支付儀器中心下各設施場地設施使用費將以"院外學術單位"收費標準為依據

院外繳費方式

請使用者選擇一種繳費方式完成付款。

  1. 電匯
    • 帳號:004056030013
    • 戶名:中央研究院301專戶
    • 銀行:土地銀行南港分行
    • 完成匯款後,請來信或傳真提供下列資訊,以利查詢。
      1. 使用核心設施名稱
      2. 收據抬頭
      3. 收件人姓名
      4. 收件人地址
      5. 收據張數(一個案件一張/多個案件合併一張收據)
      6. 匯款證明單據電子檔(郵政跨行匯款申請書/國庫機關專戶存款收款書/匯款單)
      7. 案件申請單電子檔(工作表單)
    • 收據將於三周內寄出
  2. 掛號郵寄支票
    • 支票抬頭:中央研究院
    • 郵寄地址:115 台北市南港區研究院路二段128號 跨領域研究大樓A102室
    • 中央研究院學術及儀器事務處儀器管理科 邱文棋先生 收
    • 收據將於一周內寄出
  3. 現場繳納
    • 請持支票或現金至中央研究院學術及儀器事務處儀器管理科(跨領域研究大樓A102室),向邱文棋先生現場繳納。
    • 立即領取收據

Order

  • Please submit your application form to: inflamcore@ibms.sinica.edu.tw
  • Multi-Plex Immunoassay Set:
    • Human 6-Plex: IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17A, TNF-α
    • Human 12-Plex: IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12(p70) , IL-13, IL-15, IL-17A, TNF-α, IFN-γ
    • Mouse 6-Plex: IL-1β, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF-α, IFN-γ
    • Mouse 12-Plex: IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17A, IL-23, TNF-α, IFN-γ
  • ICF offer customization services which clients can choose the mediators they want to detect.

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Introduction

  • Immunohistochemistry (IHC) staining is performed on formalin fixed paraffin embedded tissue sections.
  • ICF provide antibodies for IHC staining of immune cells, including T cell (CD3, CD4, CD8), B cell (B220), macrophage (F4/80), neutrophil (Ly-6G).
  • Customization services can be performed with clients provided antibodies.
Cell type Cell markers Species Organ
T cell CD3 Mouse Spleen, Thymus*
CD4 Spleen*
CD8 Spleen*
B cell B220 Spleen, Lymph node*, Thymus*
Macrophage F4/80 Colon
Neutrophil Ly-6G Colon
*fixed with Zinc fixative buffer
Examples:
IHC example

Price

Item Research institute inside Academia Sinica (NTD/slide) Research institute outside Academia Sinica (NTD/slide) Company (NTD/slide)
IHC (use client's antibody) 500 750 950
IHC (use facility’s antibody) 550 800 1000

Billing Procedures

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繳費流程

  1. 使用者填單申請
  2. 核心實驗室根據切片數量與項目計算價格。審核無誤後,再由核心E-mail通知使用者進行繳款。
  3. 使用者繳款(如有中研院院內經費,建議先行使用院內繳費方式)。
  4. 確認收到款項後,將提供收據與使用紀錄予申請者以利存檔備份。
  5. 送件通知會連同收據一同寄出,即可寄送樣本並進行服務。

※若非表列之組織(如上表),建議一種抗體先填單送件4片positive control切片進行測試,待測試完成再送件其餘切片。
※若為客製化服務(非表列上之組織與抗體),須由客戶提供染色條件。
※若為表列上之組織(如上表),核心會準備positive control切片與客戶的切片同時進行染色。
※染色完之切片由客戶自取或寄送給客戶,不提供掃片與判讀服務。
※若超過額度,可先繳交部分之費用,即可進行服務(例如:若訂單總價超過30萬可先預繳50%之費用並進行服務,並於一個月內繳清尾款)。

[繳費注意事項]
  1. 核心設施服務項目皆為付款後再開始操作,PI簽名確認並繳費後,款項不予退費。
  2. 若有特殊情形無法先繳費,請填妥 [核心訂單確認暨延遲付款切結書] ( 按此下載切結書 ),並通知核心。核心接到信件後,將函覆計畫主持人確認已收到此切結書,並提前開始執行該訂單。每個申請案僅能申請一次。
  3. 因各單位請購程序不同,使用者自提出請購到行政單位實際將經費撥款至中央研究院帳戶所需時間可能長達3-4週,請務必考量貴單位行政程序所需之時間。
[送件注意事項]
  1. 核心確認收到款項後會寄送送件通知。通知送件後若一個月內未送件,核心會再寄送一次送件通知。若超過三個月未送件視同棄單,不予退費。
  2. 若有特殊情況需延長送件時間,請來信告知核心,並告知欲送件時間。若未明確告知欲送件時間,將自動延長送件時效一個月。每個申請案僅能申請一次。

院內繳費方式

  • 請申請者回覆信件同意扣款。
  • 核心將經由院內PI轉帳系統執行轉帳。
  • 即日起,中研院同仁若使用國科會經費支付儀器中心下各設施場地設施使用費將以"院外學術單位"收費標準為依據

院外繳費方式

請使用者選擇一種繳費方式完成付款。

  1. 電匯
    • 帳號:004056030013
    • 戶名:中央研究院301專戶
    • 銀行:土地銀行南港分行
    • 完成匯款後,請來信或傳真提供下列資訊,以利查詢。
      1. 使用核心設施名稱
      2. 收據抬頭
      3. 收件人姓名
      4. 收件人地址
      5. 收據張數(一個案件一張/多個案件合併一張收據)
      6. 匯款證明單據電子檔(郵政跨行匯款申請書/國庫機關專戶存款收款書/匯款單)
      7. 案件申請單電子檔(工作表單)
    • 收據將於三周內寄出
  2. 掛號郵寄支票
    • 支票抬頭:中央研究院
    • 郵寄地址:115 台北市南港區研究院路二段128號 跨領域研究大樓A102室
    • 中央研究院學術及儀器事務處儀器管理科 邱文棋先生 收
    • 收據將於一周內寄出
  3. 現場繳納
    • 請持支票或現金至中央研究院學術及儀器事務處儀器管理科(跨領域研究大樓A102室),向邱文棋先生現場繳納。
    • 立即領取收據

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Please submit your application form to: inflamcore@ibms.sinica.edu.tw

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